Download or read book Caract risation mol culaire d chantillons organiques complexes par spectrom trie de masse et chromatographie en phase liquide written by Cédric Wolters and published by . This book was released on 2021 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Comment analyser un échantillon organique complexe ? Cette question générale semble simple de prime abord, mais requiert de s'intéresser de plus près à la notion de complexité afin de pouvoir comprendre et justifier les moyens utilisés pour la caractériser. En planétologie, et plus largement en astrophysique, l'ensemble des observations et observables indiquent que la matière qui compose les objets extraterrestres est composée d'un mélange de diverses molécules, et ce mélange est plus ou moins divers en fonction de l'objet. Observations et modélisations sont effectuées couramment pour tenter de comprendre ces objets et de contraindre leurs processus évolutifs.Caractériser la complexité moléculaire de tels objets nécessite des instruments de pointe, qui sont difficilement adaptables aux contraintes spatiales pour être placés sur une sonde, et cela requiert que l'objet étudié puisse être échantillonné. Or, la très grande majorité des objets d'intérêt ne peuvent pas être atteints dans un temps raisonnable. Dès lors, il faut un autre moyen d'étudier ces objets : c'est l'astrophysique de laboratoire. De nombreuses expériences tentent de simuler les objets et environnements dans lequel ils évoluent, et analysent l'évolution de la matière soumise à ces contraintes. Une partie des défis de ces expériences réside dans la caractérisation chimique des échantillons, et plus particulièrement dans leur caractérisation moléculaire.Dans le cadre de cette thèse, nous proposons d'utiliser la spectrométrie de masse haute résolution (HRMS) et la chromatographie en phase liquide haute performance (HPLC) pour caractériser des échantillons organiques complexes. Pour se faire, l'ensemble de la chaine analytique a été étudiée, depuis l'acquisition des données jusqu'à leur exploitation. Ainsi, nous proposons une optimisation de l'acquisition des données en Orbitrap, ainsi que des systématiques de traitement des données issues des analyses effectuées ESI-HRMS ainsi que pour des analyses effectuées en LDI-ICR. La chromatographie couplée à la spectrométrie de masse est un outil puissant pour accéder à la structure moléculaire des échantillons, et nécessite de développer des méthodes qui soient adaptés aux échantillons analysés. Nous proposons ainsi deux méthodes HPLC pour l'analyse des échantillons, qui ont été développées et validées pour l'analyse d'échantillons complexes. Cependant, aucun logiciel commercial ne permet l'analyse non supervisée de tels échantillons : un logiciel qui permette le traitement de ces données a ainsi été développé et permet de révéler la diversité moléculaire des échantillons sans supervision. Mais l'identification des molécules ainsi détectées n'est pas un processus aisé puisqu'il nécessite alors de posséder l'ensemble des isomères possibles pour chaque molécule détectée. Pour réduire cet espace des possibles, un outil de prédiction des temps de rétention est proposé qui se base sur la connaissance des propriétés physico-chimiques de composés connus afin de prédire, pour ces mêmes composés, leur temps de rétention théorique sur les méthodes utilisées.Ce travail présente dans une dernière partie l'application de l'ensemble des développements effectués au cours de ces trois années sur un jeu d'échantillons d'analogue d'aérosols atmosphériques de synthèse modélisant des exoplanètes de type super-Terres et mini-Neptunes. Depuis l'analyse de leur matière soluble, jusqu'à la comparaison entre phase soluble, insoluble et totale, l'analyse par spectrométrie de masse indique une grande diversité et des différences importantes entre échantillons, indiquant des processus de formation et d'évolution directement liés à la composition du mélange réactif. Enfin, l'analyse par chromatographie d'un de ces échantillons indique de multiples isomères, dont certains pouvant être annotés comme étant des molécules biologiques, potentiellement impliquées dans le processus de l'origine de la vie.

Download or read book La spectrom trie de masse en couplage avec la chromatographie en phase liquide et supercritique written by Carole Reymond and published by . This book was released on 2020 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Ces travaux de thèse ont porté sur la caractérisation de mélanges complexes oxygénés avec l'étude d'échantillons issus de la biomasse lignocellulosique, et de mélanges complexes hydrocarbonés via l'exemple des coupes lourdes pétrolières. La complexité chimique de ces deux types d'échantillon est propre à chacun et provient de multiples facteurs : i) les produits issus de la transformation de la biomasse lignocellulosique sont constitués de composés oxygénés étendus sur une large gamme de polarité, de masse moléculaire mais aussi de concentration, ii) les coupes lourdes pétrolières possèdent des milliers de constituants hydrocarbonés ainsi que des composés soufrés et azotés. Dans les deux cas, l'objectif de ces travaux de recherche est d'améliorer la connaissance de la composition des échantillons, ce qui est indispensable pour développer des procédés de transformation encore plus performants. Pour atteindre cet objectif, des méthodes séparatives adaptées aux propriétés des échantillons ont été mises en place et couplées à la spectrométrie de masse haute résolution (HRMS). Une méthodologie via l'utilisation de plans d'expériences a été proposée afin d'optimiser l'interface entre la dimension de séparation et la HRMS. Dans le cas des échantillons issus de la biomasse, dans un premier temps, le couplage de la chromatographie en phase liquide à polarité de phase inversée (RPLC) et de la HRMS avec une source electrospray (ESI) et une source d'ionisation chimique à pression atmosphérique (APCI) a permis une première description des échantillons. Des expériences de fragmentations successives ont mis en évidence des structures inédites. Par la suite, une méthode de chromatographie bidimensionnelle en ligne (LCxLC) dédiée à l'analyse des composés les plus polaires a été optimisée et couplée à la HRMS. La mobilité ionique (IMS) a également été étudiée afin d'évaluer son intérêt au sein des couplages réalisés. Dans le cas des coupes lourdes pétrolières, une méthode associant la chromatographie de partage centrifuge (CPC) en première dimension, la chromatographie en phase supercritique (SFC) en deuxième dimension couplée à la HRMS avec une source de photo-ionisation à pression atmosphérique (APPI) en tant que troisième dimension s'est révélée être une approche pertinente pour quantifier les hydrocarbures aromatiques polycycliques présents dans les distillats sous vide. Ce couplage hors-ligne de la CPC à la SFC a permis de construire des cartographies 2D organisées selon le degré d'insaturation et le nombre de cycles aromatiques des composés détectés, reflétant la composition détaillée des échantillons investigués. Pour terminer, les avantages et inconvénients de l'ensemble des méthodes développées au cours de cette thèse ont été discutés. Les spécificités des deux spectromètres de masse utilisés (FT-ICR et timsTOF) sont comparées en termes de résolution, vitesse d'acquisition et mécanismes de fragmentation. Une capacité de pics a été évaluée pour chaque couplage, ce qui a permis de les positionner les uns par rapport aux autres en perspective de la complexité des échantillons, du traitement des données et du besoin analytique.

Download or read book Spectroscopies vibrationnelles MCR et ATR FTIR et Chromatographie Liquide coupl e la Spectrom trie de Masse Haute R solution LC HR MS written by Elise Boireau-Adamezyk and published by . This book was released on 2015 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: La peau est l'organe le plus étendu du corps humain. Doté d'une membrane biologique fine appelée la couche cornée, celle-ci le protège du desséchement et des agressions extérieures chimiques ou mécaniques auxquelles le corps humain doit faire face. Ce travail de thèse a consisté, dans un premier temps, à décrire via la littérature existante les effets de l'âge,dûs au vieillissement intrinsèque et extrinsèque,sur la physiologie cutanée du Stratum Corneum (SC).La partie expérimentale basée sur la microscopie vibrationnelle traitera des variations de la fonction barrière et de l'hydratation du SC lors du vieillissement chronologique et photo-vieillissement. D'autres méthodes ont également été utilisées comme la chromatographie liquide en phase normale couplée à la spectrométrie de masse haute résolution dotée d'une source APCI et d'un détecteur Orbitrap pour l'étude de la composition détaillée des lipides du SC ainsi que des méthodes plus globales comme la PIE ou la cornéométrie. Le caractère non invasif de toutes ces méthodes a permis de réaliser ces études in vivo. L'évolution de la fonction barrière a été étudiée aux niveaux tissulaire, moléculaire et supramoléculaire par micro-spectroscopie confocale Raman et spectroscopie Infrarouge. Puis le lien moléculaire a été fait entre le vieillissement intrinsèque et les céramides de la matrice lipidique intercornéocytaires par chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie de masse. Les molécules discriminantes entre population jeune et âgée ont été déterminées par analyse chimiométrique. L'évolution de l'hydratation cutanée aux niveaux tissulaire, moléculaire et supramoléculaire a également été l'objet d'une investigation approfondie. Les variations de la composition des NMF et la teneur en eau dans le SC lors du vieillissement cutané ont été mises en lumière en utilisant des descripteurs spectraux Raman. Les variations structurelles des molécules d'eau impactant l'organisation supramoléculaire des édifices lipidiques ont également été évaluées. Au cours du vieillissement, la fonction barrière cutanée et hydratation sont conservées.

Download or read book Chromatographie multidimensionnelle written by Thomas Dutriez and published by . This book was released on 2010 with total page 435 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: La croissance de la demande pétrolière et la limitation des ressources disponibles exigent une valorisation plus poussée du pétrole tout en limitant l'impact sur l'environnement. Ceci peut être réalisé par la mise en œuvre de procédés plus performants de purification et de conversion des coupes lourdes, notamment les distillats sous vide (DSV) (350-615°C), vers des bases "carburants". Les procédés envisagés, e.g. hydrocraquage, ont un coût d'investissement très important. Parmi les axes d'amélioration, la mise en œuvre de modèles cinétiques plus précis constitue un enjeu stratégique qui s'appuie notamment sur les progrès de la caractérisation analytique des charges, l'objectif analytique étant d'obtenir une information détaillée par fraction molaire. Les données expérimentales disponibles pour les coupes lourdes sont limitées à des descriptions macroscopiques, restreignant ainsi la compréhension des réactions et donc la mise au point de modèles prédictifs (modèles de regroupement ou de réseaux d'étapes élémentaires). L'objectif de la thèse est de disposer d'un nouvel outil de caractérisation analytique des DSV, afin d'améliorer le lien entre description des charges et modèles de reconstruction, mais également pour étendre la connaissance sur les effluents des procédés de conversion, mais aussi sur le rôle des catalyseurs. L'enjeu est aussi de disposer d'un développement méthodologique applicable à terme à d'autres types de matrices complexes : liquéfiats de charbon, biomasse... Pour répondre à cette problématique, nous avons mis en œuvre des systèmes de chromatographie multidimensionnelle, permettant d'obtenir une grande capacité d'information sur les matrices très complexes. Dans une première approche, nous avons pu étendre la gamme de la chromatographie gazeuse bidimensionnelle (GC×GC) vers les DSV par l'emploi de conditions haute température (GC×GC-HT). Des choix raisonnés de conditions opératoires et un plan d'expérience ont permis l'élution des paraffines lourdes jusqu'à (nC60). En raison du nombre des coélutions, il s’est avéré indispensable d’étendre la sélectivité globale en ajoutant une dimension de séparation supplémentaire ou de détection. Ainsi le fractionnement de la matrice par chromatographie liquide (LC) hors ligne ou, en ligne, par chromatographie en phase supercritique (SFC) a permis d'obtenir une quantification étendue par nombre d'atomes de carbone et par familles chimiques. Ces développements ont conduit à la conception d'une instrumentation flexible innovante à trois dimensions : SFC-×GC×GC. Dans une troisième approche, l'ajout de détecteurs spécifiques du soufre et de l'azote à la GC×GC-HT a été étudié. L'emploi de nouvelles phases stationnaires, notamment à liquide ionique via l'étude de différentes combinaisons, a conduit à des résultats innovants pour les coupes lourdes. Dans une dernière partie, afin d'obtenir un mélange représentatif de matrices DSV, tous les résultats analytiques ont été rassemblés. Un ajustement des fractions molaires des molécules le composant a été nécessaire via une méthode de maximisation d'entropie, pour obtenir des résultats plus proches des valeurs expérimentales. In fine, outre les avancées analytiques liées à la GC×GC, ces travaux de thèse ont permis d'apporter des premiers éléments de réponses pour la compréhension de la réactivité liée à l'hydrotraitement. Les informations obtenues sont suffisamment pertinentes pour permettre d'enrichir l'étude du procédé via la compréhension des mécanismes réactionnels et la modélisation cinétique qui en découle

Download or read book D veloppement de l interface entre la chromatographie liquide nano d bits nanoHPLC et le spectrom tre de masse source d ionisation par plasma couplage inductif ICP MS written by Pierre Giusti and published by . This book was released on 2006 with total page 153 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Des millions d’années d’évolution ont débouchées sur des biomolécules spécifiques capables de complexer ou d’intégrer dans leur structure des hétéroatomes ou des métaux. Leur présence est indispensable pour le bon déroulement de certains processus biochimiques fondamentaux et leur absence peut être à l’origine de maladies ou de dysfonctionnements. L’architecture moléculaire déployée est souvent très complexe et l’étude des biomolécules a énormément progressé depuis le développement des sources d’ionisation electrospray et MALDI en complément des techniques de résonances magnétiques nucléaire (RMN). Cependant ces techniques ne permettent pas toujours d’analyser les composés minoritaires que sont les metallobiomolécules, ou celles dont l’hétéroatome qu’elles contiennent jouent un rôle biochimique clé. Le travail de recherche présenté a pour objet l’identification de ces biomolécules et surtout leur quantification par le biais de l’hétéroatome ou du métal qu’elles contiennent. Outre le grand nombre de molécules qu’ils comportent, les échantillons d’origine biologique ont la particularité d’être souvent réduits à des volumes inférieurs au microlitre. L’utilisation de techniques séparatives miniaturisées telles que les systèmes nanoHPLC furent donc requises. Le développement du couplage nanoHPLC - ICP MS, point focal de cette thèse, a nécessité la mise au point d’une nouvelle interface brevetée, et a permis la détection et la quantification des hétéroatomes contenus dans les biomolécules ciblées. L’utilisation du couplage parallèle utilisant cette fois un spectromètre de masse moléculaire permis ensuite de déterminer leur structure.

Download or read book Utilisation de la chromatographie liquide coupl e la spectrom trie de masse pour l analyse de m dicaments dans les fluides biologiques written by Didier Patrick Ortelli and published by . This book was released on 2001 with total page 236 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Ce travail avait pour buts de déterminer le potentiel de la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse pour l'analyse de médicaments dans les fluides biologiques et de tester de nouvelles techniques de préparation d'échantillons pouvant être couplées à la séparation chromatographique. La méthadone a été employée comme molécule modèle et analysée dans différents fluides biologiques dans le cadre d'une étude clinique. Différentes techniques d'extraction ont été testées. Parmi celles-ci, l'extraction sur phase solide en ligne a été particulièrement étudiée afin d'automatiser et de réduire le temps de l'analyse. Ainsi, les phases à accès restreint ont été testées pour l'analyse de la méthadone et ses métabolites. Finalement, deux applications employant la LC-MS ont été développées. La première concerne le dosage d'un composé antimalarique dans le plasma et la seconde concerne l'identification et le dosage de diterpénoides dans des extraits d'huile de graines de l'épurge.

Download or read book Chromatographie en Phase Liquide Int gralement Bidimentionnelle written by Ramia Al Bakain and published by . This book was released on 2011 with total page 244 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: La demande sociétale pour caractériser des échantillons complexes dont le nombre de constituants présents dépasse plusieurs centaines, est de plus en plus forte aussi bien dans le domaine environnemental que dans celui de la sante publique. Des outils analytiques toujours plus performants sont nécessaires pour répondre à ces problématiques. De manière complémentaire au traitement sélectif de l'échantillon, lorsqu'une caractérisation globale de l'échantillon est recherchée, les technique séparative multidimensionnelles apparaissent comme la solution pour améliorer drastiquement le pouvoir séparatif. Le but de cette thèse est de mettre en œuvre et de mieux comprendre le couplage en LC×LC grâce à des études portant sur l'orthogonalité, le couplage en ligne et hors ligne avec la détection UV et la spectrométrie de masse. L'objectif étant de pouvoir mettre en œuvre et développer la chromatographie en phase liquide intégralement bidimensionnelle ou "LC×LC" pour l'analyse de mélanges complexes de composés peu volatils. Pour réaliser cet objectif, le travail de thèse a compris plusieurs étapes : nous avons étudié les combinaisons de mécanismes de séparation en phase inverse qui permettraient de réaliser des couplages favorables du point de vue de l'orthogonalité. Puis, nous avons optimisé les meilleures conditions qui conviennent à notre système pour réaliser une séparation rapide et efficace dans la deuxième dimension. Ensuite, nous avons réalisé le couplage LC×LC en ligne en adaptant des systèmes chromatographiques existant et en développant éventuellement les outils qui font défaut.-Enfin, des stratégies chimiométriques et statistiques pour le traitement des résultats.

Download or read book Analyse d une prot ine cibl e par immunoaffinit et digestion sur micror acteur enzimatique coupl s en ligne une analyse par chromatographie liquide et spectrom trie de masse written by Annabelle Cingöz and published by . This book was released on 2009 with total page 283 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: L’étude de protéines ciblées comme des biomarqueurs dans des matrices biologiques est un réel défi pour le diagnostic médical. De nos jours, la technique de choix est la chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie de masse. Cependant, l’analyse d’une protéine induit une étape de traitement d’échantillon afin de purifier au mieux la matrice biologique. En vue d’une automatisation totale de l'analyse, une étape d'extraction sélective a été couplée à un réacteur enzymatique suivie de l’analyse par CPL-SM. Tout d’abord, différents réacteurs enzymatiques ont été préparés et évalués. Puis, une étape extraction a été développée via un immunoadsorbant (IS). L’IS a ensuite été couplé à l’analyse pour une application à un échantillon de plasma dopé. Enfin, un des défis analytiques actuels est la miniaturisation du système analytique afin d’augmenter la sensibilité. Ainsi, un réacteur enzymatique a été préparé dans en format capillaire. L’efficacité de digestion a été démontrée sur un substrat de faible poids moléculaire. La synthèse d’un IS miniaturisé sera envisagée dans le but d’un couplage avec le réacteur enzymatique et l’analyse par nano-CPL/SM.

Download or read book High throughput Analysis of Small Molecules in Biological Fluids Using Liquid Chromatography Coupled to Mass Spectrometry written by Emmanuel Bourgogne and published by . This book was released on 2007 with total page 254 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Ce travail s'articule en 4 parties. Dans un premier temps, une énumération sera faite des différentes techniques et stratégies actuellement utilisées en bioanalyse pour la quantification par spectrométrie de masse de petites molécules d'intérêt pharmaceutique dans des fluides biologiques. Dans un second temps, différentes stratégies utilisant le système de SPE en ligne Prospekt 2, dans lequel l'extraction de l'échantillon est totalement intégrée avec le système LC-MS, seront développées. Des interférents endogènes issus des fluides biologiques peuvent générer des phénomènes de suppression, voire d'augmentation d'ionisation, connus sous le nom d'effet matrice. Dans un troisième temps, une nouvelle approche utilisant l'analyse en composante principale permettra de visualiser les composants plasmatiques susceptibles d'être responsables de cet effet matrice. Enfin, une nouvelle technique de quantification, associant une source d'ionisation de type MALDI équipée d'un laser à haute vitesse et couplée à un spectromètre de masse en mode tandem opérant en mode SRM, sera décrite.

Download or read book Nouvelle technique d optimisation de la d tection mol culaire base d un spectrom tre microscope FTIR written by Hamza Landari and published by . This book was released on 2021 with total page 147 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: L’identification et la quantification des espèces transmise aux cellules nerveuses lors des échanges moléculaires entre les neurones sous la forme de neurotransmetteurs nous permettent de mieux comprendre certains fonctionnements du cerveau et certaines maladies neurodégénératives. À son tour, cette compréhension nous permettrait à long terme d’améliorer la qualité de vie des patients souffrants de ces maladies. D’un autre côté, la composition des aliments sous la forme de valeurs nutritionnelles nous permet de mieux connaître l’effet de la consommation de ces aliments sur la santé afin d’éviter de graves complications. De plus, la connaissance de cette composition nous permet d’améliorer la qualité de ces produits. Pour extraire la composition et la concentration des neurotransmetteurs dans le cerveau ou les valeurs nutritionnelles des aliments, il faut développer des outils d’analyse chimique et moléculaire très précise et sélective. L’analyse chimique d’un échantillon biologique nécessite deux étapes : (1)l’échantillonnage du liquide biologique et (2) l’étude de la composition de l’échantillon. Cette dernière étape consiste à identifier/quantifier la composition moléculaire des échantillons et à caractériser les propriétés chimiques de ces derniers. Cette étape nécessite donc le développement des instruments et des algorithmes de détection moléculaire avancés qui permettent de déterminer les concentrations physiologiques des neurotransmetteurs et d’autres molécules biologiques. Dans cette étude, nous nous sommes intéressés aux neurotransmetteurs suivants: dopamine hydrochloride, acide L-ascorbique, acétylcholine chloride, y-aminobutyrique, glycineet acide L-glutamique et aux molécules de sucre, incluant le glucose, le fructose et le saccharose. Le choix de l’instrument à utiliser dépend de plusieurs critères, dont les caractéristiques del’échantillon (viscosité, volume parmi d’autres). Dans le cadre de cette thèse de doctorat, nous examinons les performances de plusieurs méthodes et instruments de détection, soit l’électrochimie, la spectroscopie d’impédance et la spectroscopie UV/Visible et infrarouge (IR), pour la détection de différents types de molécules dans des échantillons aqueux. Par la suite, nous proposons une nouvelle approche d’analyse des échantillons aqueux basée sur la spectroscopieI R. Nous nous intéressons plus particulièrement au spectromètre microscope-FTIR qui nous permet d’effectuer des analyses spectroscopiques IR et de visualiser la distribution spatiale et moléculaire dans l’échantillon. Cependant, le spectromètre microscope-FTIR, dans sa configuration standard, ne permet pas l’analyse des échantillons aqueux à cause de la forte absorption des rayonnements IR par les molécules d’eau. Pour résoudre ce problème, nous avons proposé un nouveau système microfluidique de contrôle et de manipulation des liquides qui a été intégré au spectromètre microscope-FTIR pour analyser des échantillons aqueux. Le nouveau système proposé consiste en un module de réflexion, une couche hydrophobe et un module microfluidique. Le module de réflexion est maintenu à une température élevée pour l’évaporation rapide du solvant. La couche hydrophobe permet à son tour de confiner l’échantillon en un espace restreint pour avoir une distribution plus uniforme des molécules sur la surface du substrat. Ce nouveau système nous a permis d’identifier et de quantifier différents types de molécules tels que les neurotransmetteurs et les molécules de sucres, dont le glucose, le fructose et le saccharose. La limite de détection que nous avons pu atteindre avec notre système est de 10 μMolaire pour les neurotransmetteurs, de 3 mMolaire pour le glucose et le fructose et de 1 mMolaire pour le saccharose. En plus, nous avons proposé un nouvel algorithme pourune identification automatique des neurotransmetteurs par le microscope FTIR. À travers cetalgorithme, nous avons pu identifier, dans des solutions synthétiques (homogènes et hétérogènes), les six neurotransmetteurs suivants : la dopamine hydrochloride, l’acide L-ascorbique,l’acétylcholine chloride, l’y-aminobutyrique, la glycine et l’acide L-glutamique. La précision de la détection du nouvel algorithme est de 75% à 100% pour les six neurotransmetteurs que nous avons étudiés dans 36 échantillons homogènes et 45 échantillons hétérogènes.

Download or read book Signature mol culaire de milieux complexes written by Laëtitia Fougère and published by . This book was released on 2019 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: La composition en métabolites des organismes vivants évolue lorsqu'ils sont soumis à des modifications environnementales et diffère d'une espèce à l'autre. L'objectif de cette thèse a été de déployer des stratégies de couplages chromatographiques avec la spectrométrie de masse et de traitement des données MS pour répondre aux différentes problématiques rencontrées en termes de caractérisation, quantification et comparaison du contenu moléculaire de milieux complexes.Ces études ont permis en premier lieu, de développer des méthodes de déréplication par TLC/MS pour identifier rapidement les molécules connues et évaluer la composition des milieux d'intérêt. Afin d'améliorer et de standardiser la comparaison de différents échantillons des traitements d'images des plaques TLC ont été effectués et des études statistiques ont été appliquées. De plus, des couplages de la TLC avec la MS ont été développés pour pouvoir identifier différentes familles moléculaires de faible masse (flavonoïdes, stéroïdes). Dans un second temps, une méthodologie a été mise en place en UHPLC/HRMS pour caractériser la présence de 30 flavonoïdes C et O-glycosylés dans des échantillons de soies de maïs de différentes variétés et aider à la sélection de variétés efficaces pour lutter contre l'infestation de ravageurs. Des approches de représentation visuelle du contenu moléculaire ont été utilisées pour cibler les molécules d'intérêt, puis elles ont été quantifiées par UHPLC/MRM MS. Les différentes empreintes chromatographiques ont été comparées en utilisant des traitements statistiques afin de mettre en évidence les différences entre ces variétés et identifier les molécules permettant cette distinction.

Download or read book Caract risation HPLC SEC FTIR de la Mati re Organique Dissouteproduite Par la Pompe Microbienne de Carbone written by Abdou Ben Ali Daoud and published by . This book was released on 2020 with total page pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: "La matière organique (MO) est un des réservoirs géochimiques les plus actifs qui impliquent, sur une grande échelle, le cycle du carbone et celui des autres éléments vitaux comme l'azote et l'oxygène. Les milieux aquatiques, la majorité de la MO est sous forme de MO dissoute (MOD). Dans les océans, la plupart de la MOD n'est pas dégradé biologiquement, ce qui explique sa séquestration dans ce compartiment aquatique : l'âge moyen de la MOD est alors estimée à plusieurs milliers d'années. À ce jour, l'origine de cette MOD réfractaire (MODR) est encore mal connue. Pour parfaire nos connaissances du cycle de la MO, il est ainsi essentiel d'étudier le rôle de la pompe microbienne de C qui regroupe l'ensemble des processus qui contribuent à la formation de MODR à partir des substrats labiles. Une telle étude exige la caractérisation des molécules présentes dans la MOD. Les méthodes analytiques les plus employées pour la caractérisation de la MOD, notamment la spectrométrie de masse à haute résolution (FT-MS), la résonance magnétique nucléaire (RMN) et la spectrométrie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR), ont une efficacité limitée dû à la complexité des plusieurs milliers de molécules présentes. De plus, en raison de la faible concentration en MOD des eaux naturelles (vs sels), ces méthodes exigent généralement de concentrer ou d'extraire la MOD ce qui occasionne des pertes de certaines molécules. Dans cette étude, des expériences d'incubation ont été réalisées dans des eaux douces et des eaux de mer synthétiques avec du glucose comme seule source de carbone pour les microorganismes pour une période d'un an. L'objectif principal était ensuite de caractériser la MOD produite par les microorganismes, via la PMC par chromatographie d'exclusion stérique (HPLC-SEC) couplée à la spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR) et de comparer avec la composition d'échantillons de MOD d'eauxnaturelles." - Extrait du résumé.

Download or read book ANALYSE DE MATRICES ORGANIQUES COMPLEXES PAR COUPLAGE DE LA CHROMATOGRAPHIE EN PHASE SUPERCRITIQUE AVEC L INFRAROUGE A TRANSFORMEE DE FOURIER written by BEATRICE.. YVER and published by . This book was released on 1996 with total page 233 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: L'ETUDE DE MATRICES ORGANIQUES COMPLEXES EN LIAISON AVEC L'ENVIRONNEMENT TELLES QUE LES TENSIOACTIFS NON IONIQUES, LES SILICONES, LES JUS ISSUS DE LA CARBONISATION DE LA BIOMASSE, IMPLIQUE L'EMPLOI DE TECHNIQUES CHROMATOGRAPHIQUES TRES RESOLUTIVES. DANS LE BUT D'UNE IDENTIFICATION DES DIFFERENTS CONSTITUANTS DE CES MATRICES, LE COUPLAGE AU SYSTEME CHROMATOGRAPHIQUE DE DETECTEURS NON SEULEMENT SPECIFIQUES MAIS EGALEMENT GENERATEURS D'INFORMATIONS STRUCTURALES SE REVELE CAPITAL. C'EST DANS CET ESPRIT QU'ONT ETE APPREHENDEES LES POTENTIALITES DU COUPLAGE EN LIGNE DE LA CHROMATOGRAPHIE EN PHASE SUPERCRITIQUE CAPILLAIRE AVEC LA SPECTROSCOPIE INFRAROUGE A TRANSFORMEE DE FOURIER, LA PHASE MOBILE UTILISEE ETANT LE DIOXYDE DE CARBONE. AINSI, CE COUPLAGE SE REVELE BIEN ADAPTE A L'ETUDE DES SILICONES PERMETTANT UNE RESOLUTION SATISFAISANTE DES POLYDIMETHYLSILOXANES FONCTIONNALISES OU NON ET PRESENTANT DES DEGRES DE POLYMERISATION RELATIVEMENT ELEVES, UNE DIFFERENCIATION DES HOMOLOGUES LINEAIRES ET CYCLIQUES AINSI QU'UNE ANALYSE DES COPOLYMERES. LORS DE L'ETUDE DES JUS ISSUS DE LA CARBONISATION DE LA BIOMASSE, LE COUPLAGE CPS/IRTF, QUI S'AVERE COMPLEMENTAIRE DU COUPLAGE DE LA CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE AVEC LA SPECTRAMETRIE DE MASSE, PERMET DE CONFIRMER OU D'INFIRMER LA PRESENCE DE CERTAINS PRODUITS ET AINSI DE LEVER D'EVENTUELLES AMBIGUITES. ENFIN, DANS LE CAS DES TENSIOACTIFS NON IONIQUES, UNE RESOLUTION PARTIELLE DES COPOLYMERES DE POLYETHYLENEGLYCOLS ET DE POLYPROPYLENEGLYCOLS PEUT ETRE ENVISAGEE A L'AIDE DE CE COUPLAGE

Download or read book Application du couplage chromatographie liquide spectrom trie de masse l tude de la biodisponibilit de peptides issus de produits laitiers et la prot omique written by François Delalande and published by . This book was released on 2003 with total page 252 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Le couplage chromatographie liquide-spectrométrie de masse est devenu une méthode de choix pour la quantification de molécules dans une matrice, la détermination des séquences primaires de peptides et de protéines ainsi que la mise en évidence de modifications post-traductionnelles. Les progrès réalisés tant au niveau de la LC qu'au niveau de la spectrométrie de masse ont aussi révolutionné la biologie en permettant une identification sur des quantités femtomolaires de protéines séparées par électrophorèse bidimensionelle dans le cadre d'études protéomiques et la détection toujours plus sensible de molécules d'intérêt par exemple dans les fluides biologiques (plasma, urine, LCR).Mon travail de thèse a porté sur le choix et la mise au point de stratégies instrumentales et analytiques en optimisant de façon poussée tous les paramètres du couplage LC-MS et LC-MS-MS. La première partie concerne la mise au point expérimentale de techniques de microLC-MS et microLC-MS-MS pour la caractérisation de composés peptidiques et la mesure de leur biodisponibilité. La seconde partie porte sur le développement, l'optimisation et l'utilisation de la nano-LC-MS pour l'étude protéomique avec une première étude protéomique visant à caractériser les interactions entre le riz et le rice yellow mottle virus. Ce travail a permis par les techniques MALDI-MS et LC-MS-MS, de mettre en évidence les protéines du riz recrutées par les protéines de capside du virus et l'identification des protéines différentiellement exprimées selon la variété de riz (résistant/sensible). La seconde étude protéomique concerne la caractérisation de marqueurs d'expressions liés à l'anomalie "Mantled" chez le palmier à huile faisant appel au séquençage de novo. Pour conclure, nous avons utilisé les multiples potentiels du couplage microLC-MS et nanoLC-MS-MS pour répondre à différents problèmes biologiques. Ces réponses n'ont pu être obtenues que grâce à la mise au point de méthodologie particulière.

Download or read book Fractionnement et caract risation de la mati re organique dissoutede diff rents milieux aquatiques par un syst me HPLC FTIR written by Mathieu Hébert and published by . This book was released on 2015 with total page pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: "Avec une quantité de carbone organique similaire à celle du CO2 atmosphérique, le réservoir de matière organique dissoute (MOD) aquatique joue un rôle essentiel dans le cycle global de carbone. Les impacts de la MOD dans les écosystèmes et sur le climat sont potentiellement importants mais encore mal connus. À ce jour, la composition de la MOD demeure majoritairement inconnue : la MOD est un mélange très complexe et hétérogène de centaines de milliers de molécules ayant des tailles, polarités ainsi que d'autres propriétés physicochimiques différentes. La composition et la concentration de la MOD peuvent aussi varier selon son origine (ex. rivière vs. océan). Puisqu'on retrouve simultanément une multitude de différentes molécules dans les milieux aquatiques, l'analyse et la caractérisation de la MOD avec les techniques actuelles est difficile, surtout dans les eaux marines où les sels peuvent interférer. Le traitement des données devient aussi très complexe. Ce projet cherchait à séparer, en fractions de tailles et de polarité, la MOD afin de mieux la caractériser. Il s'agissait plus spécifiquement de coupler la chromatographie liquide à haute performance (HPLC) à la spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR) via une interface permettant d'éliminer la phase mobile de l'HPLC. Ce couplage permet d'obtenir une certaine séparation de la MOD suivie d'une caractérisation par FTIR desdifférentes fractions. --Sommaire.

Download or read book DEVELOPPEMENT DU COUPLAGE DE LA CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE AVEC LA SPECTROMETRIE DE MASSE PAR L INTERFACE FAB A FLUX CONTINU CARACTERISATION DES PROTEINES H T ET L DU COMPLEXE DE LA GLYCINE DECARBOXYLASE DES FEUILLES DE POIS written by VERONIQUE.. LOUVET MERAND and published by . This book was released on 1994 with total page 178 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: AU COURS DE CE TRAVAIL NOUS AVONS UTILISE DIFFERENTES TECHNIQUES DE SPECTROMETRIE DE MASSE DESTINEES A RESOUDRE DES PROBLEMES ANALYTIQUES DANS LE DOMAINE DE LA STRUCTURE DES PROTEINES. DANS LE BUT DE GAGNER DU TEMPS ET DE LA SENSIBILITE DANS LES ANALYSES, NOUS AVONS DEVELOPPE LE COUPLAGE DE LA CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE (HPLC) AVEC LA SPECTROMETRIE DE MASSE (MS) EN MODE FAB FAST ATOM BOMBARDMENT PAR L'INTERFACE FAB A FLUX CONTINU (CF/FAB). CE COUPLAGE A ETE REALISE AVEC DES COLONNES CAPILLAIRES DE DIAMETRE INTERNE 0,25 MM. IL S'EST AVERE ETRE BIEN ADAPTE A L'ETUDE DE MELANGES COMPLEXES DE PEPTIDES DE MASSES INFERIEURES A 5000 DA AVEC UNE SENSIBILITE DE L'ORDRE DE 20 A 200 PMOL POUR UN PEPTIDE DE MASSE 1000 DA. CETTE SENSIBILITE DECROIT AU FUR ET A MESURE QUE NOUS ELEVONS DANS LE DOMAINE DE MASSE. PAR LA SUITE, LES TECHNIQUES DE COUPLAGE DE L'HPLC AVEC LA SPECTROMETRIE DE MASSE, PAR L'INTERFACE CF/FAB MAIS AUSSI PAR L'INTERFACE ELECTROSPRAY (ESI), ONT ETE UTILISEES POUR L'ETUDE DE LA STRUCTURE PRIMAIRE ET DES MODIFICATIONS POST-TRADUCTIONNELLES DES PROTEINES H, T ET L DU COMPLEXE DE LA GLYCINE DECARBOXYLASE DES MITOCHONDRIES DES FEUILLES DE POIS. AINSI, LES ANALYSES DES FRAGMENTS ISSUS DE COUPURES CHIMIQUES OU ENZYMATIQUES DES PROTEINES H (14,1 KDA) ET T (40,9 KDA) ONT PERMIS DE VERIFIER LES SEQUENCES DE CES DEUX PROTEINES ETABLIES A PARTIR DE LEURS ADNC. NOUS AVONS AUSSI LOCALISER LA POSITION EXACTE DU COFACTEUR LIPOATE DE LA PROTEINE H. LA MESURE DE LA MASSE DE LA PROTEINE L (49,7 KDA) CONFIRME LA SEQUENCE DE LA PROTEINE. DE PLUS, ELLE MONTRE QU'IL N'Y A DE LIAISON COVALENTE NI ENTRE LES DEUX SOUS UNITES DE LA PROTEINE, NI ENTRE LA PROTEINE ET SON COFACTEUR, ET QUE LA PROTEINE L CONTIENT UNE MODIFICATION POST-TRADUCTIONNELLE DE 32 DA ENVIRON

Download or read book La d tection spectrophotom trique des mol cules de faible masse mol culaire non chromophores en chromatographie liquide haute performance CLHP written by Jean Paul N'Zila-Ibiassi and published by . This book was released on 1995 with total page 208 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: